苏州艾莱萨生物科技有限公司

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C肽(C-P)ELISA试剂盒
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C肽(C-P)ELISA试剂盒
编号: E-83-96
检测范围: 0-8ng/ml
功能类别: 糖尿病类
方法: 夹心法 一步法
品牌: ELSBIO
规格: 96T
价格:
2400.00
备注: 临床诊断试剂
购买数量:
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产品名称          

     通用名:人C肽(C-P)测定试剂盒(酶联免疫法)

     英文名:Quantitative determination kit for Human C-Peptide (ELISA)

包装规格

     本试剂盒为48人份/盒或96人份/盒。

预期用途

     本试剂盒用于体外实验测定血清中CC-P)的含量

     胰岛素的合成首先是在胰岛β细胞中合成胰岛素原(Proinsulin),胰岛素原在酶的作用下裂解,释放出胰岛素以及在胰岛素原中连接胰岛素A链和B链的一段多肽(connection peptide),因此被称为C肽(C-Peptide)。人C肽在血液循环中的生物半衰期比胰岛素长2~5倍,因此C肽的水平更能稳定地反应胰岛素分泌的情况,并且可用于区分内源性胰岛素与注射胰岛素。

检测原理

     采用酶联免疫夹心法测定血清中C含量。首先用一株单抗包被微孔板,制成固相抗体,然后加入待测血清及用辣根过氧化物酶标记的另一株单抗,使之形成包被抗体-C-标记抗体的复合物,经显色后在酶标仪测定吸光值(OD值),通过计算机或作图拟合浓度-吸光度曲线,反算出待测血清中C含量。

适用仪器

     各种型号酶标仪,450nm滤光片,选配600-630nm滤光片

     适用于各种类型的洗板机。

样本要求

     取血样后分离血清3000rpm离心6分钟以上),血清样本收集后应尽快置-20℃冻存。如当天检测也可以置2-8贮存,样本应避免反复冻融。样本使用前应置室温(18-25)融化并充分摇匀,平衡至室温后再行测试。

主要组成成分

组分/规格

96T

48T

主要成分

预包被板

96

48

包被抗C-P抗体

标准品一套

冻干粉×6

冻干粉×6

C-P

酶标抗体

6ml

3ml

HRP--C-P

浓缩洗涤20×

15ml

15ml

NaCl,磷酸盐,吐温-20

样本稀释液

6ml

3ml

蒸馏水,Proclin-300

显色剂A

6ml

3ml

过氧化脲素

显色剂B

6ml

3ml

TMB

终止液

6ml

3ml

稀硫酸

封板膜

2

2


说明书

1

1


密封袋、干燥剂

1

1


     标准S0-S50.5ml蒸馏水溶解后,浓度如下

单位

S0

S1

S2

S3

S4

S5

ng/ml

0

0.3

1

2

4

8

     各组分应在使用前充分混匀。

储存条件及有效期

     试剂盒保存于2-8℃。有效期为12个月,请在试剂盒标注的有效期内使用。

      微孔板打开后应置有干燥剂的封口袋中密封防潮保存。

      标准品溶解后应冻存(-20℃

检验方法

操作步骤

     1、将各种试剂移至室温(18-25)平衡半小时,取浓缩洗涤液,根据当批检测数量,用蒸馏水1:20稀释,混匀后备用。

     2、标准S0-S5第一次使用前先用0.5ml蒸馏水溶解,放置混匀10分钟后使用。

     3预包被板从密封袋中取出,设一个空白对照孔,不加任何液体;每个准点依次各设两孔,每孔加入相应的标准50μl其余每个检测直接加待测血清50μl

     4每孔空白孔加入酶标抗体5l充分混匀,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育1小时

     5、手工洗板:弃去孔内液体,洗涤液注满各孔,静置10秒甩干,重复3次后拍干。洗板机洗板:选择洗涤3次程序洗板后拍干

     6每孔(包括空白孔)显色剂A50μl显色剂B50μl振荡混匀后,置37℃避光显色15分钟,每孔加终止液50μl

     7、用酶标仪读数(450nm),用空白孔调零,测定各孔OD值。

数据处理

     1、手工作图:用双对数坐标纸,标准品浓度横轴以对应的OD值为纵轴,画出平滑曲线或直线,在曲线上按照待测血清OD值找到对应的浓度

     2、计算器/机:使用线性拟合功能,标准品S1S5浓度取对数(Log(浓度)),作为X,将对应的吸光值取对数(Log(OD))作为Y,选择双对数(或称全对数)Log-Log拟合方程:Log(OD1-5)=k Log(浓度1-5)+sks为直线参数。从拟合线上计算出待测血清的浓度。

参考范围

     1、正常人空腹血为0.56-3.25ng/ml,餐后1小时为2.88-10.1ng/ml,餐后/空腹比值一般应>2倍(本公司实测结果为1.74-7.49倍)。餐后3小时下降至接近空腹。

     此参考值为本实验室在严格条件下的测定结果,各实验室应当建立自己的参考值范围。

     22016121日本实验室测定11名献血员空腹及餐后血,计算出参考范围如下:


空腹

30分钟

60分钟

120分钟

180分钟

60分钟/空腹

最大值

3.25

8.35

10.06

6.19

3.62

6.69

最小值

0.60

1.92

3.66

1.59

0.54

1.63

均值

1.67

4.18

4.51

3.08

1.74

3.63

参考范围

0.56-3.25

1.92-8.35

2.88-10.1

1.59-6.19

0.54-3.62

>1.6

检测方法的局限性

     溶血、乳糜血样本影响测定结果。

产品性能指标

     1灵敏度: 0.10 ng/ml

     2、精密度:变异系数:(CV<15%

     3、特异性:与 Pro-insulinINS的交叉反应符合要求。

注意事项

     1、本品仅供体外实验。

     2、双波长仪器可以不设空白孔,也无需调零。

     3、做实验前必须将试剂盒恢复至室温,加试剂前应先摇匀,加样中应避免交叉污染。

     4、温育反应过程中必须粘贴封板膜。

     5、不同批次试剂不能混用。

     6、结果判断须在反应终止后10分钟内完成。

     7、试剂含有动物源性物质,应按实验室有关规定处置。