背景介绍:
促红细胞生成素(EPO)是一种34-39kda的分泌糖蛋白,属于Ⅰ型细胞因子超家族成员。EPO主要由肾脏(间质性肾小管周围成纤维细胞)和肝脏(肝细胞和Ito细胞)中的细胞产生,缺氧可上调EPO的生成。促红细胞生成素是调节红细胞增殖和分化,维持循环红细胞量的生理水平的主要激素。小鼠促红细胞生成素与大鼠促红细胞生成素的氨基酸序列同源性为94%,与人促红细胞生成素的氨基酸序列同源性为80%。EPO除了在促红细胞生成中的作用外,还作用于各种非造血细胞,发挥其作为一种生存和增殖因子的作用。EPO可以刺激成肌细胞增殖,同时抑制其分化,从而导致祖细胞群的扩大。EPO是一种组织保护因子,可保护神经、心血管和肾组织免受缺血性和毒性损伤。
检测原理:
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗小鼠EPO抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品和待测样本,经过孵育,样本中存在的EPO与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后,加入生物素化的检测抗体孵育。洗涤去除未结合的生物素化的抗体,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素 (Streptavidin-HRP)。洗涤后,加入显色底物TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中EPO的浓度成正比。加入终止液终止反应,在450 nm波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。